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              貓皰疹病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)

              對貓眼鼻分泌物中貓皰疹病毒DNA進行檢測。

              • 產品品牌: REAGEN
              • 產品貨號: RPD990202
              • 產品規格: 50/100T
              • 產品適用: 對貓眼鼻分泌物中貓皰疹病毒DNA進行檢測。
              • 產地來源: 深圳

              【產品名稱】

              通用名稱:貓皰疹病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR)

              【包裝規格】

              50人份/

              【預期用途】

              貓眼鼻分泌物中貓皰疹病毒DNA進行檢測。

              【檢驗原理】

              本試劑盒采用聚合酶鏈式反應(PCR)結合Taqman技術,對貓皰疹病毒的特異性DNA核酸片段進行熒光PCR檢測。

              【主要成分】

               

              組分成分

              50人份/

              主要成分

              規格

              數量

               

              PCR反應液

               

              1014μL /

               

              1

              引物、探針、脫氧核糖核苷三磷酸(dNTP)、緩沖體系

              酶混合液

              26μL /

              1

              Taq酶、UDG

              陽性對照

              200μL /

              1

              含目的片段的質粒

              陰性對照

              500μL /

              1

              生理鹽水

               【儲存條件及有效期】

              試劑置于-30~-15避光保存,有效期為12個月。本產品反復凍融應不超過5。

              【適用儀器】

              熒光定量PCR儀:ABI 7500熒光PCR.;ABI Quantstudio5 ;Gentier 96R;SLAN-96P全自動醫用PCR分析系統。

              【樣本要求】

              眼鼻分泌物

              【檢驗方法】

              1. 樣本處理

              請根據具體樣本類型選用適當的核酸提取試劑(自備) 并按照該試劑的說明書提取 DNA。提純后的核酸應盡快用于檢測,或-20℃保存。

              2. 試劑配置(在準備區進行,與擴增區分開,冰上操作

              注:試劑使用前要完全解凍,使用前渦旋混勻,10000 rpm離心5 s,確保試劑完全離心至管底,否則會

              出現裝量差異的現象。

              若有N個待檢測樣本,則需配置N+2擴增反應(待檢樣本數N+1個陽性質控品+1個陰性質控品,按下表要求進行擴增反應液的配制,配制完成后充分震蕩混勻,10000 rpm離心5 s。按每管20μL分裝至0.2 ml PCR管中,并做好標記,擴增反應液需現配現用。 


              N人份(μL)

              PCR反應液

              N+2×19.5

              酶混合液

              N+2×0.5

              總量

              N+2×20

              3. 加樣在樣品處理區進行,冰上操作

              按陰性質控品、待測樣品、陽性質控品的加樣順序,分別取5μL,加入至已分裝擴增反應液的PCR管中,反應總體系為25μL。蓋緊管蓋,短暫離心后置于熒光定量PCR儀中,并記錄樣本擺放順序。

              4. 擴增反應(在擴增區進行

              選擇FAM通道檢測貓皰疹病毒核酸。按以下擴增程序表設置PCR擴增參數。

              步驟

              溫度

              時間

              循環數

              1

              預變性

              95

              3min

              1

              2

              變性

              95

              10sec

              45cycle

              3

              退火延伸及熒光檢測

              60

              30 sec

              報告熒光:FAM;淬滅熒光:NONE。

              5. 質量控制


              FAM通道Ct

              陰性對照

              UNDET

              陽性對照

              35

              以上要求需在同一次實驗中同時滿足,否則,本次實驗無效,需重新進行。

              6.結果判讀

              反應結束自動保存結果,根據分析后圖像調節Baseline Start 值、End 值以及Threshold 值(可以根據實際情況自行調整,Start 值可以在3~15、End 值可設在5~20,調整陰性對照的擴增曲線平直或低于閾值線),點擊Analysis 自動獲得分析結果,在Report 界面觀看結果。

              試驗結果判斷


              通道

              陽性判斷條件

              1

              FAM

              Ct40,且擴增曲線呈典型S,報告陽性

              2

              FAM

              Ct>40,報告為陰性。

              檢驗結果的解釋

              1. 實驗室環境污染,試劑污染,樣品交叉污染會出現假陽性結果,如陰性對照檢測為陽性,則需做進

              一步實驗來確認是哪類污染。如為試劑污染,需開封新的試劑盒再次進行實驗;如為樣品交叉污染,應重復實驗;如為實驗室環境污染,需對實驗室進行徹底清潔或更換實驗室再進行實驗。

              2. 試劑運輸、保存或配制不當會引起試劑檢測性能下降,出現假陰性結果。如陽性對照檢測為陰性,

              應開封新的試劑盒再進行實驗。

              檢測方法的局限性

              1. 該試劑盒僅為定性產品,不做定量測定。

              2. 當樣本病毒含量低于最低檢出限時,可能會出現假陰性。陰性結果僅說明提取的核酸濃度低于該試劑盒的檢測極限,但不能完全排除病毒感染的可能。

              【產品性能指標】

              1.準確性企業陽性參考品檢測結果全部為陽性,陽性率為15/15。

              2.最低檢測限:該試劑盒最低檢測限為500copies/mL。

              注意事項

              1.請嚴格按照操作步驟操作,試劑配制和加樣等步驟請嚴格按照說明書要求在冰上操作。

              2試劑配制建議在試劑配制區進行,樣品處理要求生物安全柜內操作。臨床實驗室應嚴格按照《醫療機構臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》等有關分子生物學實驗室、臨床基因擴增實驗室的管理規范執行。

              3.反應液中的成分對光敏感,應避光保存。反復凍融可能降低試劑盒靈敏度,請按檢測頻次將反應液以適當體積分管保存。

              4.反應結束后,擴增管請置于密封袋內丟棄,當日清理,切忌開蓋。

              5.不同批號試劑請勿混合使用,請在有效期內使用試劑盒。

              6. 本品僅用于體外診斷。


              企業愿景

                公司將一如既往的視誠信為最重要的文化精神;在經營決策和管理的全過程中信守“以產品質量、優質服務”為原則和“為人類健康服務”為宗旨的理念;融前沿科技、全球資源與優質人才為資本,以開拓創新、銳意進取、精益求精之精神,科學管理之導向,凝聚員工、客商之合力,同舟共濟,為實現人類的食品安全和生物醫藥業的高速發展不懈奮斗!

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